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高效液相色谱是分离、分析和纯化有机物的有效方法之一

作者:小编 来源: 日期:2020-11-2 12:41:20 人气:
高效液相色谱(HPLC)是分离、分析和纯化有机物(包括通过化学反应转化为有机物的无机物)的有效方法之一。原子光谱也可用于痕量元素的分析。高效液相色谱法(HPLC)可分离和分析80%的已知有机物。该方法条件温和,对样品无损伤,特别适用于沸点高、气化挥发困难、热稳定性差的有机物和生物物质。
高效液相色谱系统一般由检测器、注射器、色谱柱、输液泵、数据记录和处理装置组成。色谱柱、检测器和输液泵是关键部件。一些仪器包括梯度洗脱装置、在线脱气器、自动进样器、色谱柱或保护装置、柱温控制器等。现代高效液相色谱仪器还配有微机控制系统,用于仪器的自动控制和数据处理。制备型高效液相色谱仪器还配备有自动组分收集装置。
输液泵
1、泵的结构和性能
泵的种类很多,恒流泵按结构可分为螺杆喷射泵、柱塞往复泵和分离式往复泵。恒压泵由于受柱阴极的影响,流量不稳定;螺杆泵的缸体过大,这两种泵已被淘汰,应用最广泛的是往复式活塞泵。往复式活塞泵的液缸体积小,可达到0.1ml,流动相易于清洗和更换,特别适合循环使用和梯度洗脱。
2、进样阀
通常使用六通进样阀用于HPLC分析。六通进样阀的关键部件由圆形密封垫(转子)和固定底座(定子)组成。六通阀的注射方式有两种:部分填充法和完全填充法。① 采用部分填充法时,进样量不应大于定量环体积的50%(最多75%),每次进样量应准确一致。该方法的准确度和重复性取决于进样的熟练程度,容易产生因进样引起的峰展宽。② 采用完全充液法时,进样量不应小于定量环体积的5-10倍,不应小于定量环体积的9倍,至少3倍,以完全取代定量环的内、流动相,消除壁效应,保证注射的准确性和重复性。
 
 
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